為了建立高效、穩(wěn)定的白木香結(jié)香技術(shù)體系,亟需盡快尋找新的強(qiáng)誘導(dǎo)結(jié)香菌株,我們?cè)邳S綠墨耳菌接種白木香及產(chǎn)香的基礎(chǔ)上,多次從五指山下的天然沉香內(nèi)生菌內(nèi),提取并分離培養(yǎng)出比黃綠墨耳菌表現(xiàn)更佳的可可毛色二孢菌Lasiodiplodia,可可毛色二孢菌經(jīng)感染白木香植物后、能加速沉香的快速形成。在健康白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg樹上接種可可毛色二孢菌真菌培養(yǎng)液一個(gè)月后即可檢測(cè)到沉香色酮化合物的芐基丙酮,而對(duì)比黃綠墨耳感染真菌的木材組織中只有很少的芐基丙酮成分。
通過(guò)可可毛色二孢菌與黃綠墨耳菌的對(duì)比試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn);采用GC/MS/DS和掃描電鏡對(duì)黃綠墨耳接菌的白木香進(jìn)行了觀察研究,結(jié)果表明;感染真菌的木材中,未能檢出白木香醛及其它沉香倍半茹化合物;1個(gè)月后掃描電鏡中觀察到感染真菌產(chǎn)生綜紅色反應(yīng)帶的白木香木材組織中的細(xì)胞開始死亡,同時(shí)產(chǎn)生3種細(xì)胞代謝產(chǎn)物;在感染真菌2個(gè)月的木材組織中開始檢出白木香醛,其白木香醛的含量隨感染的時(shí)間而增加,從第三個(gè)月后含量增加顯著。在對(duì)比試驗(yàn)中,沉香中色酮類化合物的相對(duì)數(shù)量也呈增加趨勢(shì),但不明顯。由于黃綠墨耳菌為擔(dān)子菌類真菌是一種無(wú)致病性、專營(yíng)腐生生活的木材腐朽菌,白木香并非其天然寄主,黃綠墨耳菌株在白木香樹干生長(zhǎng)非常緩慢,因而導(dǎo)致其結(jié)香效率不高且不穩(wěn)定,
采用可可毛色二孢菌接菌法僅半年結(jié)香的沉香就含有國(guó)產(chǎn)沉香特征性成分白木香醛及馬兜鈴烯、α-綠葉烯、纈草醛、絨白乳菇醛等倍半萜類化合物。接菌法一年結(jié)香的沉香揮發(fā)油產(chǎn)生了沉香特征性成分如:沉香螺旋醇、白木香醛等倍半萜類化合物及2-(2-苯乙基)色原酮類化合物,并且兩種沉香的脂肪酸均主要由棕櫚酸、硬脂酸等組成,與文獻(xiàn)報(bào)道的白木香揮發(fā)油的脂肪酸成分基本一致,說(shuō)明這些成分來(lái)自于沉香樣品中殘留的白木香植物成分。
用可可毛色二孢菌人工接菌白木香樹結(jié)香的沉香揮發(fā)油中,均含有國(guó)產(chǎn)沉香特征性成分白木香醛,說(shuō)明;二者明顯的不同在于可可毛色二孢菌從接菌法一年結(jié)香的沉香揮發(fā)油中檢出了二個(gè)2-(2-苯乙基)色原酮類化合物,且總含量達(dá)到29.12%。這是首次從國(guó)產(chǎn)沉香的揮發(fā)油中檢出此類化合物,進(jìn)一步觀察二孢菌一年結(jié)香的沉香中出現(xiàn)了沉香螺旋醇及2-(2-苯乙基)色原酮類化合物等主要指標(biāo),同時(shí)脂肪酸類化合物含量明顯減少,其試驗(yàn)結(jié)果充分證明了可可毛色二孢菌的接菌質(zhì)量和顯著的效率優(yōu)勢(shì),要明顯強(qiáng)于目前研究和應(yīng)用較多的黃綠墨耳接菌結(jié)香的沉香。由此可見(jiàn)可可毛色二孢菌新菌類的新應(yīng)用,對(duì)于促進(jìn)我國(guó)沉香事業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展具有十分重要的意義。