云南紅豆杉紫杉烯合成酶基因克隆、序列分析與植物表達(dá)載體的構(gòu)建

    摘要：利用分段RT-PCR法成功地從云南紅豆杉葉片總RNA中分離出兩條長(zhǎng)約1.4kb和1.5kb的cDNA片段，克隆到pUCm-T載體中，序列拼接分析表明，該cDNA片段與Wildung M R 等發(fā)表的紫杉三烯合成酶基因編碼區(qū)2568bp有41個(gè)核苷酸不同，同源性為98.42％，具有編碼862個(gè)氨基酸蛋白質(zhì)的能力。為了檢測(cè)所克隆的基因編碼產(chǎn)物是否具有活性，并進(jìn)一步制備抗體以便于將來(lái)轉(zhuǎn)基因植物的檢測(cè)，構(gòu)建了一個(gè)酵母表達(dá)載體GAPA-T14；為了轉(zhuǎn)化植物構(gòu)建了兩個(gè)具有不同啟動(dòng)子的植物表達(dá)載體，PBI121-T14（含35S啟動(dòng)子）和pBIH-T14（在pBI121的基礎(chǔ)上以膠乳特異啟動(dòng)子）。

    關(guān)鍵詞：云南紅豆杉；紫杉烯合成酶；植物表達(dá)載體；cDNA克?。蛔仙济?br />     中圖分類號(hào)：Q78
    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
    文章編號(hào)：1007-7847(2005)01-0024-05 原版全文