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發(fā)布產(chǎn)品
植物源殺蟲劑作用機(jī)制特殊、靶標(biāo)專一性強(qiáng)，且安全性較高，屬于人們常說的“無公害農(nóng)藥”，中的一大類別-從天然產(chǎn)品中尋找殺蟲活性物質(zhì)，是創(chuàng)制和生產(chǎn)新型殺蟲劑的重要途徑之一-植物精油是植物體內(nèi)的重要次生物質(zhì)，是由分子量相對較小的簡單化合物組成的混合物，它們對昆蟲表現(xiàn)出不同程度的引誘，拒食、驅(qū)避、抑制生長發(fā)育及直接毒殺作用。
目前人們對植物精油的研究和應(yīng)用主要局限于香料植物的食品工業(yè)、煙酒工業(yè)和日用化學(xué)工業(yè)等，而對植物精油在農(nóng)業(yè)上殺蟲的應(yīng)用研究并不多。龍柏Dragon uniper(Junchinensisuor．kaizuca)是圓柏的一個變種，屬于裸子植物，柏科檜柏屬。柏科植物精油的研究極少，僅見砂地柏的殺蟲活性報(bào)道。我們在篩選過程中發(fā)現(xiàn)龍柏精油對小菜蛾P(guān)lutella xylosteUaL．具有一定的生物活性，并做了初步探討，其結(jié)果報(bào)道如下。
1 材料與方法
1．1 試驗(yàn)蟲源和材料
小菜蛾引自福建農(nóng)林大學(xué)生物防治研究所網(wǎng)室，在室內(nèi)繼代飼養(yǎng)。每次試驗(yàn)時，隨機(jī)挑選健康、大小基本一致的2齡幼蟲供試。
龍柏采自福建農(nóng)林大學(xué)校園內(nèi)。使用前洗凈、風(fēng)干并粉碎成粉末(過40目篩)，經(jīng)水蒸氣蒸餾得到精油。
1．2 試驗(yàn)方法
1．2．1 精油的制備：將洗凈、風(fēng)干，粉碎的龍柏粉末(過40目篩)，經(jīng)水蒸氣蒸餾后用無水乙醚萃取，再經(jīng)無水硫酸鈉脫水后過濾，回收乙醚，得到淡黃色有刺激性氣味液體即為龍柏精油，出油率為0．5％。
1．2．2 龍柏精油對小菜蛾的生物活性測定：
(1)對小菜蛾成蟲的產(chǎn)卵忌避作用：將已長有3或4片子葉的福州黃花芥蘭(Brassicaatbograbra bailay)苗移栽到盛有營養(yǎng)液的試管(直徑5 cm，高10cm)中(每管1株苗)，管口用棉花塞住，待移栽苗成活后備用。試驗(yàn)時將龍柏精油用丙酮稀釋成不同的濃度，以丙酮為空白對照。用毛筆將各處理藥液涂抹到芥蘭苗葉片的正反面后晾干。每處理3個重復(fù)，然后將處理后的黃花芥蘭苗放人長250 cm、寬40 cm、高55 cm的養(yǎng)蟲籠內(nèi)，同時放人25對剛羽化的小菜蛾成蟲。24 h和48 h后調(diào)查成蟲在葉片上的產(chǎn)卵數(shù)，每處理3盆。并按下列公式求出產(chǎn)卵忌避率：產(chǎn)卵忌避率(％)＝[(CK組卵數(shù)一處理組卵數(shù))／CK組卵數(shù)1 x 100?；\內(nèi)吊有蘸10％蜜水的棉球。
(2)對小菜蛾2齡幼蟲的非選擇性拒食作用：參考朱芬等的直接涂布法，并略有改進(jìn)。試驗(yàn)時將精油用丙酮稀釋成不同的濃度，以丙酮為空白對照。用毛筆將各處理藥液涂到芥蘭苗(方法同(1))各葉的正反面，晾干后放到底部墊有濾紙的生測瓶中(直徑9 cm，高ll sm)。再接人經(jīng)饑餓4 h的2齡幼蟲10頭，每處理3個重復(fù)，于接蟲后24 h、48 h采用透明坐標(biāo)膠片測定各葉被取食面積。
非選擇性拒食率(％)＝［(CK組取食量一處理組取食量)／CK組取食量1 x100。
(3)對小菜蛾2齡幼蟲的熏蒸作用：參考江志利等的三角瓶密閉熏蒸法lQ，。在三角瓶(曠二300mL)內(nèi)接人小菜蛾2齡幼蟲，在橡皮塞上固定1塊濾紙條(1 Smx 9 cm)，向?yàn)V紙條上定量滴加供試精油后，迅速蓋好橡皮塞。每處理試蟲10頭，重復(fù)3次，以點(diǎn)等量丙酮作對照。處理試蟲放于養(yǎng)蟲室(25±1℃：RH：70％—80％；L／D：12h／12 h)內(nèi)，觀察藥后24 h、48 h幼蟲的中毒死亡情況，計(jì)算校正死亡率。校正死亡率(％)＝[(處理死亡率—對照死亡率)／(1—對照死亡率)1 x100。
(4)對小菜蛾2齡幼蟲的觸殺活性測定：參考侯華民等的點(diǎn)滴法進(jìn)行，以丙酮為溶劑將精油稀釋至所需濃度，然后用微量點(diǎn)滴器將精油溶液點(diǎn)滴到試蟲的背部，每處理試蟲10頭，重復(fù)3次。24h和48 h后觀察試蟲的死亡率。
2 結(jié)果與分析
2．1 龍柏精油對小菜蛾成蟲的產(chǎn)卵忌避作用
不同濃度的龍柏精油對小菜蛾的產(chǎn)卵忌避作用測定結(jié)果如表1。不同濃度的龍柏精油對小菜蛾的產(chǎn)卵忌避作用隨精油濃度的增加而增加，不同濃度間差異顯著，但不同濃度龍柏精油24h的忌避率均高于48 h的忌避率，說明隨著時間的延長忌避效果下降。其中當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00mg／L和2．50 mg／L時，24 h小菜蛾的產(chǎn)卵忌避率分別為80．45％和77．42％；而48 h則分別為72．30％和61．79％，分別比24 h的產(chǎn)卵忌避率降低了8．15％和15．63％。
2．2 龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的非選擇性拒食作用
龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的非選擇性拒食作用測定結(jié)果見表2。不同濃度龍柏精油對小菜蛾的拒食作用隨精油濃度的增大而增大，不同濃度之間差異達(dá)到極顯著水平。當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00，2．50和1．25 mg／L時，24 h的非選擇性拒食率分別為86．70，74．36和70．93％，48 h后的拒食率有不同程度的下降。
2．3 龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的熏蒸作用
龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲具有非常明顯的熏蒸作用(見表3)，隨著龍柏精油濃度的增加和測定時間的延長，小菜蛾的死亡率也提高，不同濃度與對照相比差異顯著。當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00，2．50和1．25 mg幾時，24 h的校正死亡率分另0為83．33，76．67和63．33％，48 h后的3個濃度對小菜蛾的校正死亡率分別上升為92．33，80．29和70．92％。
2．4 龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的觸殺作用
龍柏精油對小菜蛾具有一定的觸殺活性(見表4)，隨著龍柏精油濃度的增加和測定時間的延長，小菜蛾的死亡率也提高，不同濃度與對照相比差異顯著。當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00mg幾時效果最好，24h和48h的死亡率分別為60．00％和76．67％。
3 討論
龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲具有非常明顯的熏蒸作用，且隨著處理時間和濃度的增加，小菜蛾幼蟲的死亡率也增加，同時熏蒸實(shí)驗(yàn)中還觀察到小菜蛾幼蟲的死蟲體與對照相比呈不同程度的扭曲縊縮現(xiàn)象，有的死蟲體僅頭部變黑，嚴(yán)重的全身變黑。龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲具有較強(qiáng)的非選擇性拒食作用，但拒食效果隨時間的延長而明顯降低，這可能與龍柏精油的揮發(fā)性有關(guān)。龍柏精油對小菜蛾的產(chǎn)卵忌避作用不穩(wěn)定，隨時間的延長產(chǎn)卵忌避效果降低。在產(chǎn)卵忌避實(shí)驗(yàn)中觀察到開始小菜蛾的成蟲大都在養(yǎng)蟲籠的頂部飛行，隨時間的延長才慢慢試著接近芥蘭菜苗，這可能也和精油的揮發(fā)性有關(guān)。龍柏精油對小菜蛾具有一定的觸殺活性。隨著龍柏精油施用濃度和時間的增加，小菜蛾的死亡率也增加。在觸殺實(shí)驗(yàn)中觀察到存活的蟲子前胸背板被點(diǎn)擊藥液處顏色呈黃褐色，整個蟲體呈現(xiàn)前細(xì)后粗狀態(tài)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果均為室內(nèi)測定，田間實(shí)驗(yàn)效果如何有待于進(jìn)一步的研究。
龍柏植物資源豐富，但龍柏精油的提取率比較低，作者估計(jì)可能與干樣提取有一定的關(guān)系，如果提取裝置的上樣量較大可以考慮用鮮樣提取估計(jì)提取率會有一定的提高。由于龍柏精油自身的特點(diǎn)即高揮發(fā)強(qiáng)熏蒸，所以可利用劑型加工技術(shù)將龍柏精油制成緩釋劑應(yīng)用于綠色蔬菜大棚中。以解決綠色蔬菜上農(nóng)藥的殘留量超標(biāo)并延緩害蟲的抗藥性、至于龍柏精油含有什么化合物其中的什么成分對小菜蛾起顯著的熏蒸作用本實(shí)驗(yàn)室已有研究，具體情況將另文報(bào)道。
1 材料與方法
1．1 試驗(yàn)蟲源和材料
小菜蛾引自福建農(nóng)林大學(xué)生物防治研究所網(wǎng)室，在室內(nèi)繼代飼養(yǎng)。每次試驗(yàn)時，隨機(jī)挑選健康、大小基本一致的2齡幼蟲供試。
龍柏采自福建農(nóng)林大學(xué)校園內(nèi)。使用前洗凈、風(fēng)干并粉碎成粉末(過40目篩)，經(jīng)水蒸氣蒸餾得到精油。
1．2 試驗(yàn)方法
1．2．1 精油的制備：將洗凈、風(fēng)干，粉碎的龍柏粉末(過40目篩)，經(jīng)水蒸氣蒸餾后用無水乙醚萃取，再經(jīng)無水硫酸鈉脫水后過濾，回收乙醚，得到淡黃色有刺激性氣味液體即為龍柏精油，出油率為0．5％。
1．2．2 龍柏精油對小菜蛾的生物活性測定：
(1)對小菜蛾成蟲的產(chǎn)卵忌避作用：將已長有3或4片子葉的福州黃花芥蘭(Brassicaatbograbra bailay)苗移栽到盛有營養(yǎng)液的試管(直徑5 cm，高10cm)中(每管1株苗)，管口用棉花塞住，待移栽苗成活后備用。試驗(yàn)時將龍柏精油用丙酮稀釋成不同的濃度，以丙酮為空白對照。用毛筆將各處理藥液涂抹到芥蘭苗葉片的正反面后晾干。每處理3個重復(fù)，然后將處理后的黃花芥蘭苗放人長250 cm、寬40 cm、高55 cm的養(yǎng)蟲籠內(nèi)，同時放人25對剛羽化的小菜蛾成蟲。24 h和48 h后調(diào)查成蟲在葉片上的產(chǎn)卵數(shù)，每處理3盆。并按下列公式求出產(chǎn)卵忌避率：產(chǎn)卵忌避率(％)＝[(CK組卵數(shù)一處理組卵數(shù))／CK組卵數(shù)1 x 100?；\內(nèi)吊有蘸10％蜜水的棉球。
(2)對小菜蛾2齡幼蟲的非選擇性拒食作用：參考朱芬等的直接涂布法，并略有改進(jìn)。試驗(yàn)時將精油用丙酮稀釋成不同的濃度，以丙酮為空白對照。用毛筆將各處理藥液涂到芥蘭苗(方法同(1))各葉的正反面，晾干后放到底部墊有濾紙的生測瓶中(直徑9 cm，高ll sm)。再接人經(jīng)饑餓4 h的2齡幼蟲10頭，每處理3個重復(fù)，于接蟲后24 h、48 h采用透明坐標(biāo)膠片測定各葉被取食面積。
非選擇性拒食率(％)＝［(CK組取食量一處理組取食量)／CK組取食量1 x100。
(3)對小菜蛾2齡幼蟲的熏蒸作用：參考江志利等的三角瓶密閉熏蒸法lQ，。在三角瓶(曠二300mL)內(nèi)接人小菜蛾2齡幼蟲，在橡皮塞上固定1塊濾紙條(1 Smx 9 cm)，向?yàn)V紙條上定量滴加供試精油后，迅速蓋好橡皮塞。每處理試蟲10頭，重復(fù)3次，以點(diǎn)等量丙酮作對照。處理試蟲放于養(yǎng)蟲室(25±1℃：RH：70％—80％；L／D：12h／12 h)內(nèi)，觀察藥后24 h、48 h幼蟲的中毒死亡情況，計(jì)算校正死亡率。校正死亡率(％)＝[(處理死亡率—對照死亡率)／(1—對照死亡率)1 x100。
(4)對小菜蛾2齡幼蟲的觸殺活性測定：參考侯華民等的點(diǎn)滴法進(jìn)行，以丙酮為溶劑將精油稀釋至所需濃度，然后用微量點(diǎn)滴器將精油溶液點(diǎn)滴到試蟲的背部，每處理試蟲10頭，重復(fù)3次。24h和48 h后觀察試蟲的死亡率。
2 結(jié)果與分析
2．1 龍柏精油對小菜蛾成蟲的產(chǎn)卵忌避作用
不同濃度的龍柏精油對小菜蛾的產(chǎn)卵忌避作用測定結(jié)果如表1。不同濃度的龍柏精油對小菜蛾的產(chǎn)卵忌避作用隨精油濃度的增加而增加，不同濃度間差異顯著，但不同濃度龍柏精油24h的忌避率均高于48 h的忌避率，說明隨著時間的延長忌避效果下降。其中當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00mg／L和2．50 mg／L時，24 h小菜蛾的產(chǎn)卵忌避率分別為80．45％和77．42％；而48 h則分別為72．30％和61．79％，分別比24 h的產(chǎn)卵忌避率降低了8．15％和15．63％。
2．2 龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的非選擇性拒食作用
龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的非選擇性拒食作用測定結(jié)果見表2。不同濃度龍柏精油對小菜蛾的拒食作用隨精油濃度的增大而增大，不同濃度之間差異達(dá)到極顯著水平。當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00，2．50和1．25 mg／L時，24 h的非選擇性拒食率分別為86．70，74．36和70．93％，48 h后的拒食率有不同程度的下降。
2．3 龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的熏蒸作用
龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲具有非常明顯的熏蒸作用(見表3)，隨著龍柏精油濃度的增加和測定時間的延長，小菜蛾的死亡率也提高，不同濃度與對照相比差異顯著。當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00，2．50和1．25 mg幾時，24 h的校正死亡率分另0為83．33，76．67和63．33％，48 h后的3個濃度對小菜蛾的校正死亡率分別上升為92．33，80．29和70．92％。
2．4 龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲的觸殺作用
龍柏精油對小菜蛾具有一定的觸殺活性(見表4)，隨著龍柏精油濃度的增加和測定時間的延長，小菜蛾的死亡率也提高，不同濃度與對照相比差異顯著。當(dāng)龍柏精油的濃度為5．00mg幾時效果最好，24h和48h的死亡率分別為60．00％和76．67％。
3 討論
龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲具有非常明顯的熏蒸作用，且隨著處理時間和濃度的增加，小菜蛾幼蟲的死亡率也增加，同時熏蒸實(shí)驗(yàn)中還觀察到小菜蛾幼蟲的死蟲體與對照相比呈不同程度的扭曲縊縮現(xiàn)象，有的死蟲體僅頭部變黑，嚴(yán)重的全身變黑。龍柏精油對小菜蛾2齡幼蟲具有較強(qiáng)的非選擇性拒食作用，但拒食效果隨時間的延長而明顯降低，這可能與龍柏精油的揮發(fā)性有關(guān)。龍柏精油對小菜蛾的產(chǎn)卵忌避作用不穩(wěn)定，隨時間的延長產(chǎn)卵忌避效果降低。在產(chǎn)卵忌避實(shí)驗(yàn)中觀察到開始小菜蛾的成蟲大都在養(yǎng)蟲籠的頂部飛行，隨時間的延長才慢慢試著接近芥蘭菜苗，這可能也和精油的揮發(fā)性有關(guān)。龍柏精油對小菜蛾具有一定的觸殺活性。隨著龍柏精油施用濃度和時間的增加，小菜蛾的死亡率也增加。在觸殺實(shí)驗(yàn)中觀察到存活的蟲子前胸背板被點(diǎn)擊藥液處顏色呈黃褐色，整個蟲體呈現(xiàn)前細(xì)后粗狀態(tài)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果均為室內(nèi)測定，田間實(shí)驗(yàn)效果如何有待于進(jìn)一步的研究。
龍柏植物資源豐富，但龍柏精油的提取率比較低，作者估計(jì)可能與干樣提取有一定的關(guān)系，如果提取裝置的上樣量較大可以考慮用鮮樣提取估計(jì)提取率會有一定的提高。由于龍柏精油自身的特點(diǎn)即高揮發(fā)強(qiáng)熏蒸，所以可利用劑型加工技術(shù)將龍柏精油制成緩釋劑應(yīng)用于綠色蔬菜大棚中。以解決綠色蔬菜上農(nóng)藥的殘留量超標(biāo)并延緩害蟲的抗藥性、至于龍柏精油含有什么化合物其中的什么成分對小菜蛾起顯著的熏蒸作用本實(shí)驗(yàn)室已有研究，具體情況將另文報(bào)道。