植物激素對大花蕙蘭組培快繁的影響

    摘要：在大花蕙蘭組培快繁過程中，植物激素對原球莖的誘導(dǎo)、增殖及幼苗的分化有顯著影響。細胞分裂素6-BA和生長素N從最佳配比對大花蕙蘭組織培養(yǎng)很重要，尤其是細胞分裂素影響較大。

    關(guān)鍵詞：大花蕙蘭；組織培養(yǎng)；植物激素      大花蕙蘭(Cymbidium)是蘭科蘭屬中一部分大花附生種及其雜交種的統(tǒng)稱，屬復(fù)莖地生蘭或半附生蘭，原產(chǎn)地在喜馬拉雅山脈及東南亞高山上，是世界五大重要商品蘭花之一，近幾年在我國花卉市場上流行的高檔室內(nèi)盆栽花卉，具有極高的觀賞價值，株型高大雄偉，花大而多，色彩鮮艷。由于大花蕙蘭多為雜交種，種子養(yǎng)殖無法保持其品質(zhì)特性，其結(jié)實率也相當?shù)?，分株能力弱，因而養(yǎng)殖系數(shù)低，養(yǎng)殖速度慢，遠遠不能滿足商品化生產(chǎn)的需求，而采用組織培養(yǎng)方法進行原球莖增殖可以達到工廠化生產(chǎn)目的。試驗研究植物激素對大花蕙蘭組織培養(yǎng)快速養(yǎng)殖的影響，并成功地建立了快繁體系，可以用于工廠化育苗。 
    1、材料與方法 
    1．1材料
    大花蕙蘭采自河南農(nóng)業(yè)大學(xué)蘭花園中FN4品種，切取健康飽滿10～15 cm長的芽，剝?nèi)ネ獠咳~片直到5 mm大小，消毒處理后作為外植體誘導(dǎo)材料。
    1．2 植物激素對原球莖誘導(dǎo)的影響
    以MS為基本培養(yǎng)基，6-BA設(shè)0．5、1.0、1．5、2．0 mg／L(單位下同)4個濃度水平，NAA濃度為0．2 mg／L，培養(yǎng)基均附加香蕉汁100 g／L，活性炭0．5 g／L，每處理接10瓶，每瓶接1個莖尖，培養(yǎng)30 d后，調(diào)查原球莖誘導(dǎo)率。
    1．3植物激素對原球莖增殖及幼苗分化的影響
    將誘導(dǎo)的原球莖分別接種于下列不同培養(yǎng)基中：① MS+6-BA 1．0+NAA 0．1；②MS+6-BA 1．0+NAA0．5；③MS+6-BA 1．5+NAA 0．1；④MS+6-BA l．5+NAA 0．5；⑤MS+6-BA 2．0+NAA 0．1；⑥MS+6-BA2．0+NAA 0．5，以上培養(yǎng)基均加入香蕉汁130 g／L，活性炭1.0 g／L。每瓶接種10個原球莖，每處理10瓶，培養(yǎng)40 d后，調(diào)查增殖系數(shù)及成苗數(shù)。
    1．4植物激素對幼苗生根的影響
    將原球莖增殖及幼苗分化培養(yǎng)中高于2 cm的幼苗切出，轉(zhuǎn)接到下列生根壯苗培養(yǎng)中：①1／2 MS+6-BA0．1+NAA 0．5；②1／2 MS+6-BA 0．3+NAA 0．5；③1／2 MS+6-BA 0．5+NAA 0．5；④1／2 MS+6-BA 1．0+NAA0．5，每種培養(yǎng)基均附加香蕉汁150 g／L，活性炭1．5 g／L。每瓶接20個幼苗，每處理10瓶，30 d后統(tǒng)計生根率及生長情況。以上MS培養(yǎng)基中白糖濃度為30g／L，1／2 MS培養(yǎng)中的白糖濃度為20 g／L，瓊脂為7g／L，pH值為5．3。培養(yǎng)條件：溫度為24～26℃，光照強度為1 000～1 800 lx，光照時間12～14 h／d。 
    2、結(jié)果與分析 
    2．1植物激素配比對原球莖誘導(dǎo)的影響
    從表l可以看出，隨著6-BA濃度的增大，原球莖誘導(dǎo)率逐步增高，在6-BA 1．5時達到最大，6-BA濃度再增大，原球莖誘導(dǎo)率下降，生長中發(fā)現(xiàn)細胞分裂素低濃度形成原球莖慢，并且誘導(dǎo)出原球莖數(shù)目少，高濃度形成愈傷多，原球莖少。在培養(yǎng)基MS+6-BA 1．5 mg／L+ NAA0．2 mg／L+香蕉汁100 g／L+活性炭0．5g／L原球莖誘導(dǎo)率達到90％，并且每個莖尖分化出4～5個原球莖。 表1  植物激素配比對原球莖誘導(dǎo)的影響  6-BA/mg·L-1 NAA/mg·L-1 誘導(dǎo)率/％ 原球莖分化情況 0.5 0.2 10 莖尖很少分化 1.0 0.2 40 莖尖形成２～３原球莖
    1.5 0.2 80 每個分化4～5個原球莖 2.0 0.2 20 第個分化1～2原球莖   
    2．2植物激素對原球莖增殖及幼苗分化的影響
    大花蕙蘭原球莖在增殖的過程中有幼苗的分化，長時間不轉(zhuǎn)接，會形成很多苗，因此增殖與幼苗分化同時進行。合理的激素配比會達到理想增殖與成苗。從表2可以看出，隨著細胞分裂素的增大，原球莖增殖系數(shù)也增大，但幼苗分化數(shù)卻隨著降低，綜合考慮增殖與成苗，培養(yǎng)基④最好，因此最佳增殖及幼苗分化培養(yǎng)基是 MS+6-BA 1．5 mg／L+NAA 0．5 mg／L+香蕉汁130 g／L+活性炭1．0 g／L。 表2 不同激素配比對原球莖增殖及幼苗分化的影響 培養(yǎng)基編號 接種總數(shù)/個 原球莖總數(shù)/個 增殖系數(shù) 分化苗數(shù)/個 ① 100 420 4．2 110 ② 100 610 6．1 130 ③ 100 1080 10．8 210 ④ 100 1150 11．5 480 ⑤ 100 1100 11．0 120 ⑥ 100 1230 12．3 160。
    2．3植物激素對幼苗生根的影響
    幼苗接在4種不同的生根培養(yǎng)基上均能生根，隨著細胞分裂素濃度的增大，生根率逐漸降低，說明細胞分裂素對生根有一定的促進作用，但濃度加大引起增殖影響生根，培養(yǎng)基①生根率高，生根條數(shù)多，苗長得好。故生根壯苗最佳培養(yǎng)基是1／2 MS+6-BA 0．1 mg／L+ NAA0．5 mg／L+香蕉汁150 g／L+活性炭1.5 g／L。 表3，植物激素對幼苗生根的影響 培養(yǎng)基編號 接種株數(shù)/株 生根株數(shù)/株 生根率/％ 平均根長/cm 苗長勢 ① 200 198 99 >4 苗高,長勢均等,較綠 ② 200 150 75 2～3 中等高度,較綠 ③ 200 120 60 1～2 生長緩慢,淺綠 ④ 200 60 30 <1.5 生長極滿慢,淺綠。
    3、小結(jié)與討論
    植物激素中的細胞分裂素6-BA和生長素NAA對大花蕙蘭FN4組織培養(yǎng)快速養(yǎng)殖影響很大。原球莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-BA 1．5 mg／L+NAA0．2 mg／L+香蕉汁100 g／L+白糖30 g／L+活性炭0．5g／L+瓊脂7．0 g／L，原球莖誘導(dǎo)系數(shù)可達到4～5。
    原球莖增殖及幼苗分化培養(yǎng)基是MS+6-BA1．5 mg／L+NAA 0．5 mg／L+香蕉汁130 g／L+活性炭1．0 g／L+白糖30 g／L十瓊脂7．0 g／L，探索最佳增殖與幼苗分化培養(yǎng)基中激素配比對大花蕙蘭FN4工廠化育苗有很大意義。生根壯苗培養(yǎng)基1／2 MS+6-BA0．1 mg／L+NAA 0．5 mg／L+香蕉汁150 g／L+活性炭1．5g／L+白糖20g／L+瓊脂7．0 g／L。